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ms培养基前沿信息_配一升ms培养基配方(2024年11月实时热点)

内容来源：途客网所属栏目：教程更新日期：2024-11-27

ms培养基

如何科学种植和养护拟南芥？一文搞定！植物材料的培养是进行表型实验的基础，而拟南芥作为一种模式植物，在植物相关研究中广泛应用。那么，如何科学种植和养护拟南芥呢？以下是一些实用的建议：种植方法准备培养基：将种子点在1/2MS培养基上，待种子长至双子叶期再进行移苗，注意不要太小也不要太大。准备土壤：将营养土和蛭石按1:2的比例混合，灭菌后分装到小花盆中。浇水与移苗：从托盘底部浇1/2霍格兰营养液，待小花盆的土壤完全浸湿后开始移苗。这个过程可以提前一天准备，让土壤充分吸收营养液。移苗时使用镊子，从培养基上缓缓移出，防止根系受损（拟南芥的根系对后期土培成活率非常重要）。保湿：移好的拟南芥附上保鲜膜，置于生长间保湿一周。日常管理浇水：拟南芥不喜水，培养过程中托盘不能积水。只要用手按压土壤仍是湿润的，就不需要浇水。光照：减少光照强度，光照过强会使拟南芥受胁迫，导致早抽薹。防虫：期间可适量施用线虫药和蚜虫药，尤其注意防蚜虫。观察：尽量每天都去看看植物，及时发现情况并应对，同时培养感情。任何表型实验都需要将材料养好，大家千万不要掉以轻心，否则会浪费大量时间。希望这些建议能帮助你更好地种植和养护拟南芥！

植物组织培养污染处理及培养基选择指南 24. 植物组织培养基类型有哪些？ MS培养基：1962年由穆拉辛格和斯库格设计，适合烟草细胞培养，硝酸盐浓度高，适合原生质体、细胞和组织培养。 B5培养基：1968年由甘伯尔格设计，适合大豆细胞培养，铵浓度低，适合木本植物的组织和细胞培养。富盐平衡培养基：无机盐浓度高，微量元素种类齐全，离子平衡性好，稳定性强，营养丰富。高硝态氮培养基：代表性培养基有B5、N6、SH，硝酸钾浓度高，氨态氮浓度低，含有较高浓度的硫胺素（VB1）。中盐培养基：在MS培养基基础上改良，大量元素无机盐为MS的一半，微量元素种类减少、含量增高，维生素种类增多。低盐培养基：无机盐和有机成分含量低，多用于生根培养。 25. 木本植物组织培养中生根问题如何解决？如果增殖正常但生根时出现落叶，可尝试以下方法：检查培养温度是否过高，瓶盖透气性是否差，导致乙烯积累。适当添加少量分裂素，或更换生长素，或多种生长素混合使用。 26. 培养基中糖类作为碳源的重要性蔗糖比葡萄糖更能调节培养基渗透压，减少微生物污染。生长素和蔗糖浓度影响愈伤组织中维管束的类型与数量。 27. 植物原生质体制备材料及渗透压调节剂用于植物原生质体的材料需选取生长旺盛的细胞和幼嫩组织，如无菌试管苗的叶片、胚轴及子叶、花药、愈伤组织（悬浮细胞）等。常用的渗透压调节剂有甘露醇、山梨醇、葡萄糖、蔗糖等，浓度一般为0.3～0.8 mol/L。 28. 组培苗移栽注意事项移栽前打开三角瓶的封口膜，炼苗3～5d后取出小苗，用流水洗净根部的培养基。将小苗移栽到盛有灭过菌的蛭石的营养钵中过度一下，注意不可直接浇营养液。用透明的塑料薄膜罩住小苗3～5d后移栽到土里。

𐟌𑦋Ÿ南芥种植全攻略𐟌𑊰ŸŒ🦃𓨦种好拟南芥？来看看这些小技巧吧！ 𐟌𑧧植篇𐟌𑊊1️⃣ 准备1/2MS培养基，成分包括MS、蔗糖、琼脂，PH值调至6.0。铺板时，用10mL琼脂水重悬拟南芥种子，均匀铺在培养基上。 2️⃣ 种子需在4度春化2-3天，然后放入培养室生长7天。7天后是移苗的最佳时机哦！ 𐟌𑧧𛨋—篇𐟌𑊊1️⃣ 准备基质和蛭石1:1的比例混合，加入多菌灵和花无缺，调至土壤湿润。 2️⃣ 潮湿的土壤装入花盆，注意不要挤压土壤，保持土壤空间稀疏。 3️⃣ 移苗时要小心，不要伤到拟南芥的根。如果根断了，就换一颗移吧！ 4️⃣ 移苗后用保鲜膜罩住，保持22℃，白天光照16小时，夜间黑暗8小时，5-7天后取下保鲜膜。 𐟌𑥟𙥅𛧯‡𐟌𑊊1️⃣ 每天都要去看拟南芥，跟它“聊聊天”，让它知道你在关心它哦！ 2️⃣ 抽薹前一周浇一次水，抽薹后2-3天浇一次水。注意不要涝哦！ 3️⃣ 抽薹前期要保障拟南芥的营养，可以在浇的水中加入花无缺或配好液体后一周对叶片喷施2-3次。 4️⃣ 拟南芥的标准生长周期是两个月。第一次抽薹后（大概3-5cm）把薹剪掉，这样可以让莲座叶变得更大更整齐哦！ 𐟌𑦔𖨎𗧯‡𐟌𑊊1️⃣ 在最上端花序不开花后停止浇水，用绑带和木签把拟南芥绑起来直至变成金黄色。然后剪下花序，用手搓搓种子就掉下来啦！ 2️⃣ 收获后的种子在28度烘箱中烘干两天即可贮藏或继续铺板萌发哦！

𐟌𑦋Ÿ南芥农杆菌侵染全攻略𐟒‰ 𐟔즑‡菌实验开始啦！将农杆菌加入含有卡那和利福平抗性的50mlLB培养基中，放入28℃摇床，过夜培养，让菌液OD值达到0.8-1.0。 𐟓ˆ停止摇菌后，28℃、6000rpm离心10分钟，准备侵染液啦！ 𐟒穅置侵染液：50ml菌液配50ml侵染液，加入0.11gMS、蔗糖2.5g（同1/2MS培养基），再加入10微升表面活性剂。 𐟌𜤾𕦟“步骤来啦！采用浸花法侵染20-30秒，然后遮光24小时。 𐟒ᨿ™就是我们实验室的侵染方法啦！如有不同看法或问题，欢迎留言讨论哦！

𐟥”马铃薯转基因全攻略：从入门到精通！植物基因工程技术的一个关键应用是将外源基因导入马铃薯中，以改良其遗传特性，提升产量和品质。农杆菌介导法是其中最常用的方法，具有操作简便、效率高、成本低等优点。以下是马铃薯转基因的详细步骤： 𐟌𑠩℥Ÿ𙥅𛊩€‰择生长状态良好的Desiree（底西瑞）脱毒组培苗，切取1cm左右的茎段，放置在MS培养基上，于25℃-28℃光照培养箱预培养3天，使其成为“转化感受态”。 𐟌🠥†œ杆菌侵染与共培养预培养的第二天，将携带目的基因的农杆菌LBA4404或AGL1在含有加利福平的固体培养基中划线，28℃倒置培养2天。用无菌水将农杆菌菌体重悬，调整菌液OD600=0.3~0.5，将预培养后的茎段置于菌液中侵染20分钟。侵染结束后将茎段置于滤纸上晾干，转移至MS1固体培养基中，于黑暗中共培养2天。 𐟌𑠨ﱥＦ„ˆ伤组织在100 mL锥形瓶中加入40 mL含有特美汀的无菌水，将茎段转移至锥形瓶中120 rpm振荡清洗5分钟，重复清洗4-6次，将茎段表面的农杆菌清洗干净。然后将茎段在滤纸上晾干，转移至含有特美汀的MS2诱导培养基培养10天，诱导茎段产生愈伤组织。 𐟌🠨ﱥＤ𘍥Š𝊥𐆤𚧧”Ÿ的愈伤组织转移至含有潮霉素（转化载体的筛选标记为潮霉素）和特美汀的MS3分化培养基上，每隔10天转接一次新培养基，直至诱导再生出具有抗性的不定芽。 𐟌𑠥†生与鉴定剪取具有抗性的不定芽转移至MS生根培养基中，诱导其再生出完整植株。取部分组织通过PCR、Southern blot、qPCR等方法对再生植株进行分子鉴定，确认目的基因已成功整合到马铃薯基因组中。 ⚠️ 注意事项基因型依赖性：马铃薯遗传转化效率受基因型影响较大，不同品种之间可能存在显著差异。操作细节：在遗传转化过程中，需要注意操作细节，如侵染液的浓度、共培养条件等这些都会影响转化效率；激素的种类和比例则会影响诱导再生效率；其次转化过程极易发生污染问题导致转化失败。

𐟌𑦋Ÿ南芥阳性苗筛选三步法𐟔 𐟌🧬줸€步：抗生素培养基生长鉴定在1/2MS培养基中加入筛选抗生素，如草铵膦ppt、潮霉素hyb或卡那kan。转基因拟南芥在此类培养基上生长正常，而野生型则生长异常，形成鲜明对比。 𐟍ƒ第二步：DNA水平验证在幼苗期，取叶片进行DNA粗提。利用PCR技术，以DNA为模板进行鉴定。选择合适的引物组合，如载体F与载体R，或载体F与带载体同源壁的基因引物R等，进行扩增验证。 𐟌𘧬줸‰步：RNA水平确认通过RT-qPCR分析，对以上鉴定正确的植株进行进一步确认。在RNA水平上确保转基因的表达，从而筛选出真正的阳性苗。通过这三步严谨的筛选过程，您可以高效地筛选出拟南芥阳性苗，为后续研究奠定坚实基础。𐟒ꀀ

𐟌𑦋Ÿ南芥种植全攻略𐟌𑊰ŸŒ𜧧子处理𐟌𜊊1️⃣ 取少量野生型拟南芥种子，放入1.5ml离心管中。 2️⃣ 加入1ml 75%酒精，吹打数次后静置15分钟，弃酒精。 3️⃣ 加入无水乙醇，吹打数次后静置10分钟，弃无水乙醇。 4️⃣ 静置期间颠倒离心管，用无菌水反复冲洗5次，每次1分钟。 5️⃣ 完成种子消毒，在超净工作台中进行操作。 𐟌𑧧子播种𐟌𑊊1️⃣ 将消毒后的种子点播于MS培养基中。 2️⃣ 待水分吹干后，封口置于4℃冰箱中春化2天。 3️⃣ 取出后置于人工气候箱中培养。 𐟌🥹𜨋—移栽𐟌🊊1️⃣ 当拟南芥幼苗处于四叶期时，准备营养土。 2️⃣ 将营养土装入培养盆中，待其充分吸水。 3️⃣ 将培养皿中的幼苗移栽至培养盆中。 4️⃣ 设置人工气候箱条件：光照/黑暗16/8小时，温度22℃，湿度60%。 5️⃣ 待植株初花后进入快速生长期，定期浇水、松土，观察长势。

𐟌🧃Ÿ草转基因方法详解𐟌🊦œ€近有很多朋友问关于烟草转基因的方法，今天就来详细讲解一下。如果你需要更详细的内容，可以留下邮箱哦。首先，用于做转基因的烟草苗子一定要壮一些，无菌苗长出来后可以接种到含糖的培养基上，光照一定要给足，不然苗子长出来病蔫蔫的，做转基因的时候就会死掉哦。其实有很多细节，之后有机会再开一贴单独聊。接下来是具体的操作步骤：准备无菌组培玻璃瓶、1/2MS播种培养基、无菌水、75%的酒精及10%的NaCl溶液等。将适量的种子倒入灭菌的组培瓶中，加入适量75%酒精，轻轻晃动瓶子快速消毒种子1分钟；倒掉酒精用无菌水清洗一次后，倒入适量的10%NaCl溶液（84消毒液），放置在80~100rpm摇床上避光消毒20分钟。倒掉NaCl溶液并用无菌水洗涤4-5次，将消毒清洗后的种子均匀播种到1/2MS培养基上，放入光照培养箱进行培养（光培养16h、25℃，暗培养8h、20℃）待种子发芽后（约14天），转入组培瓶中继续培养。待种子培养约40-50天后，选取处于即将长出真叶状态的幼苗，用手术刀片切去子叶的叶柄及叶尖部分，保留下来的中间部分既是外植体（必要时可选取茎段做外植体），尽量保证所切外外植体两端伤口的平整，然后转移至PC1固体培养基上，每板放置15个左右的外植体，20℃暗培养1天。取100ul保存的待转化农杆菌接种于LB培养基中，加入相应浓度的抗生素（Rif+Gen+Kan）及AS，28℃、230rpm扩繁培养至OD=0.8~1.0时，根据自身操作情况，吸取适量菌液，5000rpm离心5分钟，去除上清液，用KC液体培养基重悬并清洗菌团。再以5000rpm离心5分钟，去除上清液，加入相应体积的KC液体培养基重悬菌团使其OD=0.1。按照每板PC1培养基上使用2-3mL的农杆菌侵染液用量，将侵染液均匀铺开在培养基上，使外植体的伤口部分与侵染液充分接触，其余部分保持干燥，静置10分钟后，吸走多余侵染液，侵染后的外植体于20℃暗培养2天。将暗培养2天后的外植体转移到初次筛选培养基2Z中，每12-15天根据外植体分化情况重新转一次2Z培养基。待外植体上长出分化的芽后，将其转移到继代培养基1Z中，同样每12-15天重新转一次1Z培养基。待外植体在1Z培养基上长出有独立主茎的茎上部分后，将主茎芽体切下并插入生根培养基ENR中，15-25天后形成根。希望这些步骤能帮到你！如果有任何问题或需要更详细的解释，欢迎随时联系我哦。

𐟌𑨽쥟𚥛 拟南芥阳性苗筛选指南𐟌🊰Ÿ䔤𝠦˜縷楜觭›选转基因拟南芥阳性苗时感到困惑？别担心，这里有一份详细的指南帮助你顺利完成筛选！ 𐟓‹前期准备： 1️⃣ 1/2 MS培养基 2️⃣ 无菌水 3️⃣ 75%酒精 4️⃣ 5%次氯酸钠 𐟔쥮ž验步骤： 1️⃣ 用75%酒精消毒种子15分钟，然后离心并弃去酒精。 2️⃣ 用无菌水清洗种子一次，并弃去无菌水。 3️⃣ 在5%次氯酸钠中消毒5分钟，期间轻轻震荡。 4️⃣ 离心后弃去消毒液，用无菌水清洗种子5次。 5️⃣ 将种子铺在滤纸上吹干。 6️⃣ 将种子均匀撒在含有抗性培养基的平板上。 7️⃣ 当种子长出健康绿色的根和真叶时，可能是抗性苗，可以准备移栽啦！𐟌𑊊希望这份指南能助你顺利筛选出转基因拟南芥阳性苗！𐟒ꀀ

唉所以说不要怀念8-90年代，这个年代是个混乱的年代

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