基质胶最新娱乐体验_康宁基质胶(2024年11月深度解析)
基质胶的消毒和灭菌方法对细胞生长有什么影响?
《基质胶的消毒和灭菌方法对细胞生长有什么影响?》今天咱们来聊聊基质胶的消毒和灭菌方法,对细胞生长所产生的影响。而且辐射还可能影响基质胶里生长因子等活性成分的稳定性,间接影响细胞生长。网页链接
Transwell实验详解,测侵袭! 体外Transwells小室趋化侵袭实验——24孔趋化小室(孔径8um) 实验原理 在Transwell实验中,上室种植肿瘤细胞,下室加入FBS或特定趋化因子。肿瘤细胞会向营养成分高的下室移动。与肿瘤细胞迁移实验不同,此实验在上室侧铺上一层基质胶,模拟体内细胞外基质。细胞欲进入下室,需先分泌基质金属蛋白酶(MMPs)降解基质胶,才能通过聚碳酸酯膜。计数进入下室的细胞量可反映肿瘤细胞的侵袭能力。 实验方法大致流程 1️⃣ 将冻存的Matrigel胶在4℃冰箱中过夜解冻,使其液态化。 2️⃣ 用不含10%胎牛血清的RMPI1640培养液稀释Matrigel胶,按1:1的比例在冰水浴中混匀。 3️⃣ 将稀释后的Matrigel胶均匀铺在聚碳酸酯膜上,覆盖整个膜面,置入37℃恒温箱中静置30min-1h使其凝固形成基质屏障胶。 4️⃣ 将转染后收集的细胞或对照组细胞进行常规胰酶消化、PBS冲洗3遍。 5️⃣ 用不含10%胎牛血清的完全培养液重悬细胞,进行细胞计数并调整细胞密度至2.5㗱0^5个/mL。 6️⃣ 将形成基质屏障胶的膜用不含10%胎牛血清的RMPI1640培养液进行浸润水化。于上室加入处理后的细胞,24孔板小室一般加200。 7️⃣ 在下室内加入含有20%优质胎牛血清的RMPI1640培养液进行细胞侵袭诱导,每个组设3个平行复孔。 8️⃣ 将小室在37℃、5%的CO2恒温培养箱中培养24h后,倒弃上室中的细胞及液体,并用PBS冲洗2遍。 9️⃣ 将上室内的Matrigel基质屏障胶用棉签擦去,滤膜上层贴壁生长但未能穿过膜的细胞。将上室置于95%乙醇室温固定30min。 将固定后的膜经结晶紫染色10~15min后,蒸馏水冲洗终止染色。 1️⃣1️⃣ 显微镜下随机挑选5个低倍视野(200X)的细胞计数,以其穿膜细胞的平均数作为细胞侵袭能力的参数,计算平均值。 通过以上步骤,你可以评估肿瘤细胞的侵袭能力,进一步了解肿瘤细胞的生物学特性。
즞建类器官(胃)的奇妙之旅 즃构建一个与真实胃相似的类器官吗?采用酶消化法是个不错的选择!首先,从人胃肠道或相关病变组织中获取上皮组织。ꦎ姝,利用酶解技术将这些组织分散成细胞悬液。꧄𖥐,将这些上皮细胞与特制的基质胶混合,创造出3D培养环境。后,加入专为胃肠道上皮细胞设计的培养基,让它们在这个人工环境中生长、分化。经过一段时间的培养,你就能得到一个与真实胃肠道上皮组织结构及功能相似的活组织类器官啦!这不仅是科研上的重大突破,更是医学领域的一大飞跃。
细胞迁移与侵袭实验全攻略 细胞迁移与侵袭实验是一种研究细胞行为的强大工具。通过将Transwel小室放入培养板中,可以模拟细胞在不同环境下的迁移和侵袭行为。以下是详细的实验步骤和注意事项: ꠦ料准备 显微镜:可拍照显微镜 Transwel小室:孔径8um,未包被胶的(Coste和Corning公司的也常用) 24孔板:与购买的Transwel小室相配套 培养基:DMEM(含1%胎牛血清)和1640培养基 完全培养基:DMEM和1640完全培养基(可加至20%血清) 无菌PBS、棉签、胰酶、甲醇、结晶紫染液(0.1% (g/ml) PBS结晶紫) 砥ꌦꤊ基质胶铺板 使用BD公司的Matrigel,按1:8的比例稀释,包被Transwel小室底部膜的上室面,置于37℃30分钟使Matrigel聚合成凝胶。使用前进行基底膜水化。 制备细胞悬液 让细胞撤血清饥饿12-24小时,进一步去除血清的影响(这一步不是必须的)。 消化细胞,终止消化后离心弃去培养液,用PBS洗1-2遍,用含BSA的无血清培养基重悬,调整细胞密度至5x105/ml。 接种细胞 取100细胞悬液加入Transwel小室。 24孔板下室一般加入600含20%血清的培养基。特别注意下层培养液和小室间常会有气泡产生,一旦产生气泡,下层培养液的趋化作用就减弱甚至消失了。在种板时要特别留心,一旦出现气泡,要将小室提起,去除气泡,再将小室放进培养板。 培养细胞 常规培养12-48小时(主要依细胞侵袭能力而定),24小时较常见。时间点的选择除了要考虑到细胞的侵袭力外,处理因素对细胞数目的影响也不可忽视。 结果统计 直接计数法:贴壁细胞计数,所谓的“贴”是指细胞穿过膜后,可以附着在膜的下室侧而不会掉到下室里面去。通过给细胞染色可在镜下计数细胞。 取出Transwel小室,弃去孔中培养液,用无钙的PBS洗2遍,用甲醇固定30分钟,将小室适当风干。0.1%结晶紫染色20分钟,用棉签轻轻去掉上层未迁移细胞,用PBS洗3遍。400倍显微镜下随机五人视野观察细胞,记数。 通过以上步骤,你可以观察到细胞的迁移和侵袭行为,并对其进行定量分析。
Transwell实验,一文搞定! 实验步骤: 基质胶的准备:将保存在-20Ⰳ的基质胶转移到4Ⰳ冰箱中,让其过夜融化。使用前,用无血清培养基按1:2的比例稀释。 预处理:将24孔板和Transwell小室用1xPBS浸泡5分钟,以湿润小室。若进行侵袭实验,还需在小室中铺80 Matrigel胶,并在37Ⰳ培养箱中放置30分钟使其凝固。 젧𛆨的准备:用胰蛋白酶消化细胞,并用无血清培养液洗涤。然后,用含有1%FBS的培养基重悬细胞,计数并稀释至2x105细胞/mL(侵袭实验中为4x105细胞/mL)。将0.3mL细胞悬液接种到每个小室内,下层的24孔板中加入0.7mL含10%FBS的完全培养液,每组设3个复孔,置于37Ⰳ培养箱中培养24小时(侵袭实验中为48小时)。 固定与染色:培养结束后,每孔加入1mL 4%多聚甲醛溶液,室温固定10分钟。然后,吸去固定液,用1xPBS洗涤一次,每孔加入1mL 0.5%结晶紫溶液,染色30分钟后用1xPBS洗三次,晾干。 观察与计数:用棉签小心擦去Transwell小室内没有迁移的细胞,置于200x显微镜下观察,计数每个视野中的细胞数。 统计分析:对实验数据进行统计分析。 注意事项: 렩🥅气泡:将小室放入培养板时,要注意不要有气泡产生,因为气泡会减弱下层培养液的趋化作用。 𝠦橙䦜移细胞:用棉签小心擦去Transwell小室内没有迁移的细胞时,不能碰到已经穿膜的细胞。 饥饿处理:对于难穿膜的细胞,可以用无血清培养基饥饿处理12-24小时。
铜茶壶泡茶坏处与好处 家人们,你们有没有发现,最近铜茶壶又火了起来?作为一个爱茶的小仙女,我也忍不住入手了一个。不过,用铜茶壶泡茶到底有哪些好处和坏处呢?今天我就来跟大家聊聊这个话题,看看铜茶壶泡茶的那些事儿吧! 发茶叶香气 铜壶泡茶最大的亮点就是能瞬间激发茶叶的香气。铜的材质有净化水的能力,少量的铜在水中被洗脱和离子化,不仅能软化水质,还能让茶香得以凝聚,不易散失。铜壶的极佳封闭性、均热性和抑菌性,都有利于茶味的保持。每次泡茶时,铜壶的温润气质与茶叶的香气相互融合,真的是一种既健康又养生的体验呢! ❤️预防心血管疾病 除了茶香,铜壶泡茶还有一个隐藏技能——预防心血管疾病。铜壶煮水时,能析出微量铜元素,这些元素对身体十分有益。铜不仅参与红细胞中铜蛋白组成,还是构成人体多种铜酶的主要成分,这些酶在人体中发挥着重要的生理功能。更重要的是,铜元素在预防心血管疾病方面发挥着关键作用。能使心脏血管完好并有弹性的有基质胶原和弹性蛋白这两种物质,而这两种物质的合成过程中,含铜的氧化酶是必不可少的。因此,体内铜元素的充足摄入,有助于维护心血管的健康。现代生活中,人们摄入的铜元素普遍偏少,每日摄入量只有0.8毫克左右,而正常人每日需要铜元素2毫克。通过铜壶泡茶,可以更有效地摄取到这些必需的铜元素,从而帮助身体维持正常的生理功能。 ᩢ防癌症 姐妹们,这个发现是不是很惊喜?铜壶泡茶还有一项令人惊喜的益处——预防癌症。铜的抗癌机制在于能够抑制癌细胞的DNA转录过程,帮助人体抵抗肿瘤癌症。这一发现为癌症预防提供了新的思路和方法,而铜壶泡茶则成为了一种既简单又有效的预防手段。 ⚠️注意铜元素过量 虽然铜壶泡茶有这么多好处,但家人们也要注意啦!长期使用铜壶泡茶可能导致体内铜元素过量摄入,从而引发一系列健康问题。因此,在使用铜壶泡茶时,我们应适量控制泡茶次数和频率,以确保身体健康。 好啦不说那么多了,赶快去试试吧!有什么问题或者想了解更多的朋友都可以留言哦~感谢大家的关注!
铜壶烧水有什么好处和坏处 家人们,今天咱们来聊聊一个有点历史感的话题——铜壶烧水。虽然现代社会大家都用不锈钢壶、玻璃壶烧水了,但铜壶烧水依然在某些人群中很受欢迎。那么,铜壶烧水到底有哪些好处和坏处呢?让我来给大家详细讲讲吧! 铜壶烧水可补充铜元素预防疾病 铜壶烧水最大的好处就是能补充铜元素。大家都知道,铜元素在人体中可是非常重要的哦!它不仅能参与红细胞中铜蛋白的组成,还能构成人体多种铜酶的主要成分,对预防心血管疾病和癌症也有帮助。铜壶烧水时,铜元素会微量溶解于水中,帮助我们抗氧化、抗衰老,清除自由基,保护细胞免受损伤。更棒的是,铜还能促进人体对铁的吸收,改善贫血症状,辅助造血功能,增强免疫力。研究还表明,铜壶煮水有助于抑制癌细胞的生长和扩散,对多种癌症有抑制作用哦! ❤️铜壶烧水有助于心血管健康 除了补充铜元素,铜壶烧水对心血管健康也有很大的帮助。体内铜元素的缺乏可是导致冠心病等心血管疾病的重要因素之一哦!铜能促使心脏血管保持弹性,参与合成的基质胶原和弹性蛋白在维持心血管形态和功能方面发挥着至关重要的作用。所以,通过铜壶烧水来补充铜元素,不仅有助于预防心血管疾病的发生,还能在一定程度上保护心血管的健康。 铜壶烧水可改善缺铜症状 现代饮食中铜元素的摄入量普遍不足,每日仅约0.8毫克,而正常人体每日对铜的需求则为2毫克。这种摄入不足可能导致免疫力下降、贫血等缺铜症状的出现。而铜壶烧水正是一种有效的补充铜元素的方式哦!在煮水过程中,随着温度的升高,部分铜元素会溶解于水中,从而在饮用时得到有效补充。这种补充方式不仅方便易行,而且效果显著,能够帮助现代人改善体内缺铜的症状,维持身体的健康状态。 ⚠️注意适量摄入避免过量 虽然铜壶烧水有这么多好处,但大家在使用时也要注意适量哦!虽然铜元素在适量摄入时对人体有益,但过量摄入也可能导致一些不良后果,如肝脏负担加重等。因此,控制饮用量,避免过量摄入铜元素是非常重要的。 好啦,今天就聊到这里啦!希望大家对铜壶烧水有了更多的了解。如果你们有其他关于健康养生的问题,欢迎留言告诉我哦!感谢大家的关注,咱们下次再见啦!
3D体外模型打造更精准的生物医学研究平台 【期刊及论文名称】 《Advanced Healthcare Materials》:Bioengineered Silk Protein-Based 3D in vitro Models for Tissue Engineering and Drug Development: From Silk Matrix Properties to Biomedical Applications 【研究背景】 长久以来,2D细胞培养技术在生物医药研究中占据着重要地位。然而,这种方法的局限性也日益显现:它们无法完全模拟细胞间相互作用的复杂性和细胞外基质(ECM)的细微差别,从而限制了在研究体内组织发育、药物筛选和疾病发展等方面的应用。另一方面,虽然动物模型在生物医学研究中不可或缺,但它们也面临着成本、动物伦理和生物学差异等挑战。 为了应对这些问题,一些国家的相关组织也在尝试进行变革。例如,美国食品和药物管理局(FDA)在2022年颁布的现代化法案2.0(FDA Modernization Act 2.0),旨在鼓励药物开发过程中使用体外模型实验、计算机模拟等非动物实验方法,减少对模型动物的依赖。 죀3D体外模型的崛起】 3D体外模型技术应时而生,成为研究组织发育、药物筛选和疾病建模的重要工具。它们提供了一个更加接近体内组织的微环境,能够准确模拟组织微观结构和生理特征。目前,已经开发了基于动物蛋白、ECM混合物和合成聚合物等生物大分子的各种3D体外模型,以满足不同的研究需求。 颀죀研究团队及研究思路】 来自浙江大学的杨明英教授/帅亚俊副研究员团队联合香港中文大学的毛传斌教授团队,对动物丝蛋白的组成、结构、性质和功能进行了系统综述,并深入探讨了动物丝蛋白(主要为丝素蛋白,SF)基3D体外模型在生物医学应用中的创新进展,特别强调了SF基质在体外组织结构中独特的生理特性和重要性。 【研究内容】 该综述广泛讨论了各类动物丝蛋白类型及其作为基质胶替代物的潜力,总结了构建S3DM的多种方法,综述了S3DM在模拟皮肤、骨骼、肠道、肝脏等多种器官方面的优势和应用。未来可以朝着提高微组织细胞密度、实现体外血管化培养、通过共培养细胞增强复杂性等方向深化S3DM的构建研究。
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