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液相色谱柱前沿信息_9.1db色谱(2024年11月实时热点)

内容来源：途客网所属栏目：教程更新日期：2024-11-26

液相色谱柱

C18液相色谱柱活化指南：轻松搞定！大家好，今天我们来聊聊C18液相色谱柱的活化步骤。这个过程其实不复杂，但需要注意一些小细节，确保你的色谱柱能更好地服务于你的实验。第一步：冲洗系统首先，先把色谱柱拆下来，用纯甲醇或者纯乙腈（根据你的流动相来选择）冲洗整个仪器系统。这个过程要彻底，确保系统里没有杂质。第二步：连接色谱柱接下来，把色谱柱接回去，然后用100%的甲醇或乙腈冲洗20倍柱体积。举个例子，如果你的色谱柱是4.6 250规格的，每一步冲洗大约需要50分钟（流速1ml/min）。第三步：平衡色谱柱如果你的流动相中水相不含盐，直接用流动相平衡20柱体积。这个过程用梯度洗脱程序，冲洗比例和初始流动相比例一致。如果你的流动相中水相含盐，先用等比例不含盐的流动相冲洗20柱体积，再用流动相冲洗20柱体积。同样，用梯度洗脱程序，冲洗比例和初始流动相比例一致。第四步：检查基线最后，观察压力基线是否平稳。如果不平稳，可以适当延长平衡时间。具体操作示例示例1：实验流动相是甲醇/磷酸盐溶液，比例是50:50。色谱柱是250mm 4.6mm的C18柱子。操作步骤：先不接柱子，用纯甲醇冲洗仪器系统。接上色谱柱，分别用甲醇、甲醇水（50:50）和甲醇/磷酸盐（实际流动相）溶液平衡20柱体积。示例2：实验流动相是甲醇/磷酸盐溶液，梯度洗脱，初始比例是10（甲醇）:90（磷酸盐）。色谱柱同样是250mm 4.6mm的C18柱子。操作步骤：先不接柱子，用纯甲醇冲洗仪器系统。接上色谱柱，分别用甲醇、甲醇水（10:90）和甲醇/磷酸盐（10:90）溶液平衡20柱体积。流速推荐 4.6mm内径柱子：流速大约1ml/min。 3.0mm内径柱子：流速大约0.5ml/min。 2.1mm内径柱子：流速大约0.2ml/min。记住，不要超过色谱柱的最高耐受压力哦！希望这些步骤能帮到你，让你的C18液相色谱柱更好地为你服务！𐟒갟”쀀

液相色谱中的分子间作用力解析 𐟌𑊥œ覶𒧛𘨉𒨰𑤸�Œ分子间的作用力扮演着至关重要的角色。这些作用力不仅影响着色谱柱的选择性，还决定了化合物在色谱柱上的保留行为。让我们一起来探索这些神秘的力量吧！色散力 𐟌€ 色散力是液相色谱中常见的一种作用力。它产生于非极性分子之间，由于电子的运动导致瞬时的偶极形成。这种作用力在疏水作用中尤为突出，例如C18固定相和非极性化合物之间的作用。诱导力 𐟌꯸ 诱导力发生在非极性分子和极性分子之间。当极性分子受到非极性分子的电场作用时，非极性分子的电子会发生位移，形成诱导偶极矩。这种作用力在极性分子和非极性分子之间的相互作用中非常重要。取向力 𐟧튥–向力是极性分子之间的主要作用力。由于极性分子的电性分布不均匀，当两个极性分子相互靠近时，它们会由于偶极的同极相斥、异极相吸而发生相对转动。这种作用力在液相色谱中尤为明显，例如五氟苯基柱对芳香化合物的选择性。其他作用力 𐟌Ÿ 除了上述三种常见的作用力外，液相色谱中还存在其他多种作用力。例如，氢键作用和静电作用等。氢键作用是指一个电负性大的原子与氢结合后，再与另一个电负性大的原子靠近，形成相互作用。而静电作用则是离子交换柱的主要作用力，依靠阴阳离子之间的静电作用来分离化合物。总结 𐟓 液相色谱中的分子间作用力多种多样，每种作用力都有其独特的选择性和应用场景。了解这些作用力的原理和特点，可以帮助我们更好地理解和优化色谱分离过程。希望这篇文章能为你带来一些新的认识和启发！

𐟒ᥦ‚何选购性价比高的色谱柱？ 𐟤”想要买到既便宜又好用的色谱柱，真的不容易吗？其实，只要掌握一些小技巧，你也能轻松选购到心仪的色谱柱！ 𐟔首先，明确你的需求。是想用于液相色谱仪还是气相色谱仪？不同的仪器需要不同类型的色谱柱。同时，考虑你的预算，毕竟价格也是一个重要的考量因素。 𐟒즎夸‹来，不妨多了解一下各大品牌，比如安捷伦、YMC等，看看它们的评价和用户反馈。这些信息可以帮助你做出更明智的选择。 𐟏 当然，国产色谱柱也是一个不错的选择。随着国内技术的不断提升，国产色谱柱的质量也在逐步提高，价格相对更为亲民。 𐟛’最后，记得在购买前多比较几家，看看不同商家的优惠活动和售后服务。毕竟，良好的售后服务也是选购商品时需要考虑的重要因素。 𐟎‰希望这些小建议能帮到你，让你在选购色谱柱时更加得心应手！

液相色谱分析常见问题及解决方法在液相色谱分析中，可能会遇到各种问题，如峰拖尾、峰分裂、基线噪声等。以下是一些常见问题的原因和解决方法： 𐟍“峰拖尾或前沿原因：样品超载、固定相与样品相互作用、流动相选择不当、柱效不佳、系统污染。解决方法：减少进样量、优化流动相、检查并维护色谱柱、确保系统干净无污染。 𐟍Ÿ峰分裂或肩峰原因：样品中存在杂质、固定相中的活性位点不均匀、色谱柱损伤。解决方法：纯化样品、更换或再生色谱柱、检查固定相。 𐟍𒥟𚧺🥙ꥣ𐦈–漂移原因：流动相不纯净、检测器污染、系统泄漏、气体溶解在流动相中。解决方法：使用高纯度溶剂、清洗检测器、检查并修复系统泄漏、脱气流动相。 𐟍椿留时间变化原因：温度变化、流动相组成变化、色谱柱老化、柱温控制不稳定。解决方法：控制色谱柱和流动相的温度、确保流动相配比准确、定期维护色谱柱。 𐟍†峰面积重现性差原因：进样体积不一致、系统稳定性差、检测器响应变化。解决方法：使用自动进样器、确保系统稳定、校准检测器。 𐟍ž柱压过高原因：色谱柱堵塞、流动相过滤器的堵塞、系统管线缩窄或弯曲。解决方法：更换色谱柱或过滤器、检查并清理系统管线。 𐟍㦺𖥉‚相分离原因：流动相配比不正确、溶剂不兼容、混合不充分。解决方法：优化流动相配比、确保溶剂兼容性、使用合适的混合方法。 𐟍Ž峰形不对称原因：色谱柱问题、流动相选择不当、样品制备问题。解决方法：检查并维护色谱柱、优化流动相、改进样品制备方法。 𐟍𛧁𕦕度低原因：检测器设置不当、流动相不合适、样品浓度低。解决方法：调整检测器参数、优化流动相、提高样品浓度。 𐟍𓦢梁榴—脱问题原因：梯度混合器故障、泵性能问题、流动相配比错误。解决方法：检查并维护梯度混合器、校准泵、确保流动相配比准确。解决液相色谱分析中的问题时，通常需要综合考虑多种因素，通过系统的方法来诊断和解决问题，这可能包括调整色谱条件、维护仪器设备、改进样品制备方法以及使用高质量的试剂和溶剂。

植物激素类化合物液相液质测定全攻略植物激素是植物生长和代谢的关键调节因子，包括生长激素、乙烯、赤霉素、细胞分裂素、脱落酸和油菜素内酯等。除了这些常规激素外，还有许多微量激素在植物生长过程中发挥重要作用。要测定植物激素的种类和含量，首先需要从植物中提取相应的激素。这涉及到了解激素的物理和化学性质，如溶解性、pH值和极性等。通过使用有机溶剂进行粉碎、匀浆、提取、分离和纯化，可以得到相对纯净的激素样品溶液。在检测过程中，高效液相色谱（HPLC）是一种常用的方法。通过使用匹配的色谱柱，将化合物吸附到色谱柱内，并使用有效的流动相将激素冲洗出来。随着冲洗出来的浓度变化，会形成一个峰的形状。通过对峰面积进行积分，可以进行量化计算。为了进行量化，需要使用标准品进行对比。一般情况下，采用外标法，即标准曲线法。标准曲线是通过多个不同浓度的标准溶液在色谱条件下测定色谱峰面积和浓度之间的关系来绘制的。以色谱峰面积为纵坐标，对应的浓度为横坐标，绘制标准曲线，得到回归方程。为了确保检测结果的准确性，相关系数r2应大于0.999。为了确保检测数据的稳定可靠，还需要对重复性进行考察。质谱测定是通过LC分离后，化合物在质谱的离子源被打碎，形成一群质谱峰。通过分析质谱峰，确定化合物的种类，再通过标准曲线的方法计算出样品中的激素含量。这些方法为植物激素类化合物的定量分析提供了有效的手段，有助于深入了解植物激素在植物生长和代谢中的作用。

高效液相色谱仪操作全解析 𐟌🊩똦•ˆ液相色谱仪是科研检测中常用的仪器，主要用于分析各种化合物。以下是该仪器的结构和操作步骤：结构概述 𐟏튦Ÿ𑦸駮𑯼š位于底部，内含色谱柱，串联在管路上，用工具拧紧，避免死体积。进样装置：长盒子是进样瓶，有许多孔，用于放置样品瓶。检测器：有紫外检测器、荧光检测器、示差折光检测器、蒸发光散射检测器和质谱检测器等，有的会放在一起，有的单独放置。泵：分为二元泵和四元泵，各有优势和不足，根据实验要求选择。流动相瓶子：位于最上方，存放流动相。操作流程 𐟓Š 启动泵：排除系统中的气泡，运行流动相，直到基线平稳。进样：将样品注入进样阀，在软件中启动。观察数据：在软件中观察出峰的情况以及各项数据，以便于后期的分析。设备维护 𐟛 ️ 色谱柱：定期检查和维护。柱温：保持稳定。流动相：定期更换。流速：根据实验需求调整。泵：定期检查和维护。检测器：定期检查和维护。进样量：根据实验需求调整。应用领域 𐟌𑊈PLC检测广泛应用于植物激素、有机酸、脂溶性维生素、水溶性维生素、生物胺、18种氨基酸、皂苷类、抗生素、植物色素、黄酮多酚、腺苷、对羟基苯甲酸酯、吲哚类等物质的检测。通过这些步骤和设备，高效液相色谱仪能够精确地分析各种化合物，为科研检测提供有力支持。

高效液相色谱仪使用必知的12个关键点高效液相色谱仪的使用需要一些关键注意事项，以下是12个实用的建议，帮助你更好地操作仪器：流动相选择 𐟌Š 选择HPLC级或更高级别的流动相。使用前，用0.22um滤膜过滤，并确保瓶盖盖好，推荐使用有排气孔的瓶盖。水纯度 𐟒犤𝿧”褺Œ次蒸馏水或超纯水，现配现用，以避免微生物滋生导致系统污染。流动相温度 𐟌᯸ 流动相配制后，放置至室温再使用，以避免温差导致性能不稳定。缓冲盐的使用 𐟧‚ 使用缓冲盐时，必须过滤，并在使用前后用纯水清洗流路。避免将缓冲盐溶液留在流路中静置。色谱柱先用低比例有机相冲洗，再用高比例有机相冲洗保存，以防缓冲盐析出。避免使用高浓度磷酸缓冲盐（>10mmol/L）。乙腈流动相 𐟚능𐽩‡避免使用纯乙腈作为流动相，以免乙腈聚合引起吸不上液。如非用不可，建议使用棕色瓶存放。特殊流动相 𐟔슥릜‰丙酮、四氢呋喃、浓硫酸、浓硝酸、三氯乙酸、二氯甲烷、四氯化碳、二甲亚砜等溶剂的流动相，不要使用PEEK材料管路。卤素离子溶剂 ⚠️ 含有卤素离子的溶剂会引起不锈钢材料腐蚀，尽量避免使用。如非用不可，分析结束后，应立刻用超纯水冲洗全流路。进样器清洗液 𐟧𜊦 𙦍†析化合物的极性选择合适的清洗溶剂。流动相使用时长 ⏳ 流动相建议最多使用1-2天，避免长时间置于溶剂瓶中。流动相pH 𐟌𑊨€ƒ虑色谱柱的耐受范围，不宜在色谱柱耐受的上下限长期使用，以免影响色谱柱寿命。流动相互溶性 𐟌€ 流动相的使用需考虑互溶性，避免因流动相不互溶而导致缓冲盐析出。反相试剂与正相试剂之间需用异丙醇置换。长期不使用的操作 𐟛 ️ 仪器如长期不用时，应用甲醇冲洗保存。掌握这些关键点，高效液相色谱仪的操作将更加得心应手！

𐟛 ️ 解决柱子耐用性问题：高效液相色谱法在2020版《中国药典》中，聚维酮K30的分析方法被详细描述，主要涉及三个检测项目：N-乙烯基吡咯烷酮、2-吡咯烷酮和甲酸。这些检测项目都采用高效液相色谱法。 N-乙烯基吡咯烷酮：使用十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂，流动相为乙腈-水（10:90），检测波长为235nm。N-乙烯基吡咯烷酮峰与乙酸乙烯酯峰的分离度应大于6.0。 2-吡咯烷酮：同样使用十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂，流动相为水-乙腈-甲醇（90:5:5），检测波长为205nm。进样6次，峰面积的相对标准偏差不得过2.0%。甲酸：使用十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂，流动相为0.01mol/L磷酸二氢钾溶液-乙腈（95:5）（用磷酸调节pH值至3.0），检测波长为210nm。在分析过程中，聚维酮K30容易附着在色谱柱上，导致洗脱时间较长，从而影响保留时间和分离效果。为了解决这些问题，可以使用具有高纯度硅胶和聚合物包被技术的色谱柱，这些色谱柱提供了优越的分离能力和稳定性。

液相色谱新手操作指南：从零开始到上手嘿，大家好！最近有朋友在留言区提到想聊聊液相色谱的使用方法。其实，很多朋友在学校里都学过液相的相关理论知识，但实际操作起来还是有点紧张。今天我就从另一个角度来聊聊，如果你突然接到一个任务，要跑个液相，该怎么操作呢？确认仪器 𐟔 首先，拿到任务后，先要协调好仪器。有些公司人多仪器少，提前预约是必须的。还要确认前一个人用到什么时候，有没有用四氢呋喃或者离子对之类的试剂，哪个泵用的盐。物资准备 𐟧ꊦŒ‰照方案或质量标准配制流动相，选择对应的色谱柱。然后查一下这个色谱柱之前的使用状况，确保一切正常。仪器确认 𐟔犦Ž妉‹仪器后，先确认零部件连接正常，不漏液。这个步骤很重要，毕竟安全第一嘛。冲洗与排气 𐟚🊥𐆤𛪥™覵路切换至旁路，把用过盐或离子对的泵放入水中高流速冲洗干净。然后分别放入流动相中排气泡5分钟以上。平衡系统 𐟓‰ 以最常用的反相为例，先低流速高水相平衡系统，逐渐过渡到实验用流动相和流速。此时观察仪器是否漏液，柱压是否正常，基线是否平稳。设定方法序列 𐟓 按照方案或标准设定方法（进样方法和冲柱方法）和序列。注意反复检查参数是否正确，泵有没有放在正确的流动相里，有没有设置冲柱，有没有自动关机。有条件的最好请同事或同学帮忙复核。准备样品 𐟥„ 等待基线平衡的时间就可以制备样品了，不用全部配完。通常准备好空白溶液、空辅溶液、系统适应性溶液/对照品溶液后，观察仪器准备就绪即可先进样，进样期间再配制后续样品溶液。核对检查 𐟔 配完样品后即可观察前几针是否正常，仪器和序列正常即可放入全部样品溶液。再次检查放置位置与序列表是否一致，是否冲柱，是否设置关机，最好双人核对。数据处理 𐟓Š 序列完成后可调用之前的数据处理方法或新建合适的方法对数据进行分析。仪器交接 𐟛 ️ 取下色谱柱，带好自己的东西，填写好使用记录，将仪器正常且顺利地交接给下一个使用人。今天是为刚开始上手的朋友们准备的操作步骤。由于篇幅限制，具体操作细则和注意事项有想了解的朋友可以评论区交流。希望这些步骤能帮到你们！𐟒ꀀ

丙酮酸高效液相色谱检测全攻略𐟓Š 丙酮酸，这个听起来有点化学的名词，其实是生物细胞糖代谢的关键中间体。它是一种酸性较弱的有机酸，分子结构是CH3COCOOH，含有活化酮和羧基基团。你可能不知道，丙酮酸在化学、制药、食品、农业、生物等领域都有应用哦！丙酮酸在糖代谢中可是个大忙人，通过乙酰CoA和三羧酸循环，它能把糖、脂肪、氨基酸互相转化。丙酮酸是糖酵解途径的最终产物，可以在细胞浆中还原为乳酸供能，或者进入线粒体氧化成乙酰CoA，再进入三羧酸循环，最终氧化成二氧化碳和水，完成葡萄糖的有氧代谢。它还能和氮化物、醛、卤化物、磷化物等反应，参与生物体的糖代谢，以及胶质、氨基酸、蛋白质等的合成和代谢。要检测样本中的丙酮酸含量，最常用的方法是高效液相色谱（HPLC）。整个过程包括样品制备、色谱条件设置、标准曲线建立、样品测定和计算几个步骤。样品准备 𐟧ꊩ斥…ˆ，你得根据实验需要选择合适的生物样本，比如细胞提取物、组织匀浆或者体液等。然后对样本进行必要的预处理，比如离心、过滤或者稀释，目的是去除杂质并调整样本浓度。色谱条件优化 𐟌 在选择色谱柱时，要考虑丙酮酸的极性和分子量，选个适合的色谱柱类型。同时，优化流动相组成和流速，以获得最佳的分离效果和检测灵敏度。比如，可以用氨基柱，柱温30℃，乙腈-磷酸二氢钾（梯度洗脱）为流动相，流速1.0ml/min，紫外检测器，波长210nm等。建立标准曲线 𐟓ˆ 这一步很关键！用纯丙酮酸制备一系列不同浓度的标准溶液，通过高效液相色谱仪测定各标准溶液的峰面积或峰高。以丙酮酸浓度为横坐标，峰面积或峰高为纵坐标，绘制标准曲线。确保标准曲线具有良好的线性关系，以便后续样品中丙酮酸含量的准确计算。具体操作是准确称取丙酮酸标准品，按要求的溶剂配制5,10,20,50,100,200ug/ml的标准溶液，根据测定的色谱峰面积，对应浓度，制作标准曲线，并计算回归方程和回收率。样品测定和计算 𐟧œ€后一步，把预处理好的样品注入高效液相色谱仪中，记录丙酮酸的色谱峰。根据标准曲线和样品中丙酮酸的色谱峰面积，计算样品中丙酮酸的含量。通过这些步骤，你就能准确检测出样本中的丙酮酸含量啦！是不是觉得化学也没那么枯燥呢？𐟘‰

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